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公司新聞

DNA合成儀的使用方法和操作步驟

   以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹DNA合成儀的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯(lián)催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三***(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。DNA合成儀的使用步驟如下:
  1)仔細檢查合成儀上所有試劑瓶中的試劑量,必要時換掉試劑瓶,特別注意乙腈的量,因為該溶劑用量較大。
  2)將標記好的清潔的收集瓶裝在合成儀上。
  3)將要合成的DNA序列輸入合成儀。
  4)檢查選擇的合成步驟是否正確。
  5)選擇結(jié)束方法:TritylOffAuto是儀器的原始狀態(tài),若打算以5,—DMT基團連接純化寡核苷酸,將其轉(zhuǎn)變?yōu)門ritylOnAuto結(jié)束狀態(tài)。
  6)選擇結(jié)束方法,一般為系統(tǒng)的原始狀態(tài)。
  7)在每個柱監(jiān)視器的Username下,輸入你所希望的保存名字。
  8)以代碼代替相應的DNA序列標記每一個收集瓶。
  9)打印出每一個柱設置的詳細資料。
  10)檢查打印出來的資料是否正確。
  11)運行StartColumn步驟檢查每一個柱的位置,確保合成儀上合成柱處于正確的位置。
  12)檢查連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶)是否充滿。
  13)如果分部收集器用來收集每個DMT脫保護步驟的流出物,確保試管充分清潔干凈,并打開分部收集器,確保DMT廢液管路通向分部收集器。
  14)啟動循環(huán),運行開始程序清洗試劑管路,除去原來的試劑。



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